产品货号:
SY0588
中文名称:
内质网蓝色荧光探针(活细胞)
英文名称:
ER-Tracker Blue-White DPX,for live-cell imaging
产品规格:
50μl
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品为ER-Tracker Blue-White DPX,蓝色荧光,属于Dapoxyl(DPX)家族成员之一。DPX系列染料均具有长发射波长、高吸光系数、高量子产量、较大斯托克司频移等特点。但这些染料具有环境敏感性,会随之出现极性增强、最大荧光波长偏移到更高波长处、量子产量下降等现象。本制品溶于DMSO的1mM浓度的探针储存液,推荐工作浓度为100 nM~1μM。
ER-Tracker探针是一系列具有细胞膜透过性,对活细胞内质网具有高度选择性的探针,不像传统的DiOC6(3),该系列探针几乎不对线粒体着色,且在较低浓度即可实现对内质网的染色,且对细胞几乎无毒性。使用以下提供的优化步骤对活细胞染色后用醛固定,可以部分保留活细胞的染色特征。
分子式 | C26H21F5N4O4S |
分子量 | 580.53 |
外观 | Yellow Solution |
光谱特性 | Ex/Em=374/430~640nm |
滤片 | DAPI or UV longpass |
结构式 |
组分 | 规格 |
内质网蓝色荧光探针(活细胞) | 50μL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,干燥避光,避免反复冻融,有效期1年。
- 避免反复冻融,可根据单次用量分装保存。避免将本品储存于无霜冰箱。
- DMSO有毒,请小心操作。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 本制品仅作科研用途!
本实验方案经牛肺动脉内皮细胞优化,且已被其他常规细胞系验证。但不同的细胞类型其最佳使用条件不同,还需用户根据该方案进行进一步优化。
- 试剂准备
使用前将ER-Tracker Blue-White DPX回温至室温,并简短离心使该DMSO溶液至管底。 - 细胞样品处理及染色
- 将1mM ER-Tracker Blue-White DPX储存液按照实验要求稀释至工作浓度,推荐工作浓度100nM~1μM。建议在不影响实验结果的前提下尽量使用较低浓度探针,以避免由于浓度过高染色导致的假象。
注:使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg)稀释该探针进行染色,可得到最佳实验结果。 - 染色
对于贴壁细胞,吸除培养皿中培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液于37℃孵育细胞15~30min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养液,并在荧光显微镜下观察细胞。
注:由于ER-Tracker Blue-White DPX探针具有较高光敏感性,会产生波动较大的发射吸收峰值,使用长通DAPI滤光片效果最理想。另,操作过程中需尽量避光。细胞如需固定,请参考以下步骤。
- 将1mM ER-Tracker Blue-White DPX储存液按照实验要求稀释至工作浓度,推荐工作浓度100nM~1μM。建议在不影响实验结果的前提下尽量使用较低浓度探针,以避免由于浓度过高染色导致的假象。
- 细胞固定及透化处理
- 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞10~20min。
注:已染色细胞用醛固定后,仅部分ER-Tracker Blue-White DPX留在细胞内,荧光信号会有部分衰减。 - (可选)透化处理:若细胞还需进行后续染色,需对细胞利用0.2% TritonX-100透化10min。
- 清洗观察细胞:细胞固定后,可用合适缓冲液进行清洗,每次5min,共2次。镜检即可。
- 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞10~20min。
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